Из Одной Клетки 2 Эмбриона

Девочки всем привет, как обычно делюсь с Вами своими советами и опытом молодой мамы, хочу рассказать о Из Одной Клетки 2 Эмбриона. Возможно некоторые детали могут отличаться, как это было у Вас. Всегда необходимо консультироваться у специалистов. Естетсвенно на обычные вопросы, обычно можно быстро найти профессиональный ответ на сайте. Пишите свои комменты и замечания, совместными усилиями улучшим и дополним, так чтобы все поняли как разобраться в том или ином вопросе.

Стадии развития эмбрионов

Оплодотворенная яйцеклетка называется зиготой — это одноклеточный эмбрион, содержащий уже двойной набор хромосом, то есть от отцовского и материнского организма.

Однако наличие зигот еще недостаточно для решения вопроса о возможности переноса эмбрионов в полость матки. Сначала необходимо удостовериться в нормальном дроблении и развитии эмбрионов.

Об этом можно судить только исходя из количества и качества делящихся клеток эмбриона и не ранее, чем через сутки после оплодотворения, когда появляются первые признаки дробления.

Наиболее четко они проявляются только на второй день культивирования.

Каждый день эмбриологом проводится оценка эмбрионов с фиксацией всех параметров: количество и качество клеток эмбриона (бластомеров), скорость дробления, наличие отклонений и т.д.

Переносу подлежат только эмбрионы хорошего качества.

Перенос эмбрионов проводится на 2-й — 5-й день культивирования — в зависимости от темпов их развития и качества эмбрионов.

До недавнего времени эмбрионы культивировались в течение трех дней и затем переносились в матку и/или замораживались.

В настоящее время широко распространено так называемое продленное культивирование эмбрионов в течение пяти или шести дней, пока они не достигают стадии бластоцисты.

Бластоцисты имеют большую частоту успешной имплантации, позволяя нам переносить меньшее количество эмбрионов и снижать риск многоплодной беременности при увеличении частоты наступления беременности.

Вы можете получить ответ на все возникшие вопросы, воспользовавшись формой обратной связи или лично на консультации у врача репродуктолога.

ФОТО БУДУЩИХ ЭМБРИОНОВ

Начало

На рисунке слева: Комплекс ооцит-корона-кумулюс через час после получения. Зрелый ооцит. Клетки короны и кумулюса хорошо диспергированы и позволяют видеть круглый ооцит, завершивший первое мейотическое деление — первое полярное тельце на 11 часах

На рисунке справа: Комплекс ооцит-корона-кумулюс через 1 час после получения. Ооцит кажется нормальным. Клетки кумулюса диспергированы, однако клетки короны остаются плотными и полярное тельце не визуализируется, поэтому только удаление короны позволит точно определить степень зрелости ооцита.

На рисунке слева: Комплекс ооцит-корона-кумулюс через час после получения. Нормальный ооцит хорошей формы. Клетки кумулюса хорошо диспергированы. Полярное тельце на 11 часах.

На рисунке справа: Комплекс ооцит-корона-кумулюс через час после получения. Незрелая — клетки короны компактно расположены вокруг ооцита неправильной формы. Дозревание in vitro возможно, однако частота фертилизации и жизнеспособность эмбрионов снижены.

День I (16-20 часов после инсеминации или ИКСИ).

Пронуклеусы — признак состоявшегося оплодотворения

На рисунке слева: Аномальная фертилизация. Через 18 часов после ИКСИ ооцит правильной формы с единственным пронуклеусом и тремя нуклеолями. Перивителлиновое пространство слегка расширено, содержит множество маленьких гранул. 5-6 цитоплазматических фрагментов, включая полярные тельца, видны на 11-12 часах

На рисунке справа: Аномальная фертилизация. Через 18 часов после ИКСИ презигота меньше обычной. Цитоплазма гомогенная, содержит несколько включений. Триплоид — два пронуклеуса одинаковой формы и величины и один — меньше. Заметно разное число нуклеолей в пронуклеусах. В расширенном перивителлиновом пространстве на 12 часах два полярных тельца одинаковой величины.Зона пеллюцида интактна, неравномерной толщины с явной деформацией по левой стороне.

На рисунке слева: Аномальная фертилизация через 18 часов после инсеминации. Четыре одинаковых пронуклеуса — тетраплоид с различным числом нуклеолей. Перивителлиновое пространство почти отсутствует. Одно фрагментированное полярное тельце на 12 часах.

На рисунке справа: Триплоид

День 2: несостоявшееся первое деление. Единственный бластомер содержит пять маленьках ядер, множественная цитоплазматическая фрагментация. Дальнейшее развитие крайне мало вероятно.

День 2: асимметричное незавершенное первое деление. Дальнейшее развитие крайне мало вероятно.

Двухклеточный эмбрион, с легкой асимметрией и фрагментацией.

3-клеточный эмбрион с асинхронным делением, и легкой фрагментацией на 5 часах. Три ядра в большом бластомере и ни одного в остальных.

Морфологически ненормальный 4-клеточный эмбрион с выраженной фрагментацией, занимающей около половины объема эмбриона. Жизнеспособность таких эмбрионов резко снижена. Развитие обычно останавливается.

Морфологически нормальный 4-клеточный эмбрион. Все бластомеры одинаковой величины, с ядром и полярным тельцем на 8 часах.

Медленный 5 клеточный эмбрион: 4 одинаковых и один меньший бластомер Такие эмбрионы часто останавливаются в развитии.

Компактизация 4-клеточного эмбриона на день 3. Нередко наблюдается в среде G1.1. Биопсия эмбриона затруднена. Чтобы провести биопсию прибегают к декомпактизации, применяя среды без кальция и магния.

8-клеточный эмбрион неправильной вытянутой формы. Развитие таких эмбрионов сомнительно. Биопсия также затруднена.

День 3. 8-клеточные эмбрионы с несколькими цитоплазматическими фрагментами, которые не нарушают развитие и компактизацию эмбрионов

Рисунок 1. День 5. Ранняя бластоциста, 120 часов после инсеминации. Бластоцеле сформировано большими овальными клетками развивающегося трофобласта. Круглые клетки, сконцентри-рованные в нижнем полюсе, образуют внутреннюю клеточную массу.

Рисунок 2. День 5. Ранняя бластоциста, 120 часов после инсеминации. Бластоцеле занимает около половины зародыша. Клетки трофоэктодермы уплощены и растянуты, что аккомодирует экспансию. Клетки внутренней массы различимы внутри полости бластоцисты.

Рисунок 3. День 5, ранняя бластоциста через 120 часов после инсеминации. Клетки полигональны и тесно соединены. Ядра видны в большинстве клеток.

Рисунок 4. День 5, аномальная ранняя бластоциста через 120 часов после инсеминации состоит из небольшого бластоцеле, сформированного меньшим количеством больших плоских клеток. Все еще заметно первителлиновое пространство. Нормальное развитие такой бластоцисты мало вероятно.

Рисунок 5. День 6, аномальное развитие эмбриона.144 часа после инсеминации трофобласт состоит из большой полости, сформированной монослоем клеток трофоэктодермы. Клетки внутренней массы не идентифицируются Зона пеллюцида очень тонкая.

Рисунок 6. День 6, бластоциста в самом начале процесса хетчинга. Несколько клеток трофоэктодермы видны на 12 часах за пределами зоны пеллюцида, также как внутренняя клеточная масса.

Рисунок 7 и 8. Хэтчинг бластоцисты через 130 часов после инсеминации через V-образное отверстие, сделанное ранее в зоне пеллюцида для биопсии бластомера. Хетчинг эмбрионов при наличии отверстий происходит раньше, чем в интактных эмбрионах.

Полностью вылупившаяся морфологически нормальная бластоциста 130-l40 часов после инсеминации (a) и (b). V-образное отверстие было сделано ранее в зоне пеллюцида для биопсии бластомера. Внутренняя клеточная масса ясно видна в каждой бластоцисте.

На рисунке слева: Аномальная фертилизация. Через 18 часов после ИКСИ ооцит правильной формы с единственным пронуклеусом и тремя нуклеолями. Перивителлиновое пространство слегка расширено, содержит множество маленьких гранул. 5-6 цитоплазматических фрагментов, включая полярные тельца, видны на 11-12 часах

Эмбриологический протокол

Центральным звеном клиники «ЭмбриЛайф» является эмбриологическая лаборатория. Здесь сконцентрировано множество сложнейшей техники, которая помогает воссоздать естественные условия для развития эмбрионов. Но даже эта современная техника будет бессильна без соответствующего штата опытных эмбриологов.

Эмбриолог «ЭмбриЛайф»занимается:

• подготовкой половых клеток к оплодотворению;
• выбирает качественные гаметы для ИКСИ;
• получает ооциты во время пункции фолликулов;
• проводит непосредственно оплодотворение одним из выбранных методов (стандартное ЭКО, ИКСИ);
• работает со сложным мужским фактором – выделяет сперматозоиды из биоптата яичка (TESA, TESE) и использует их для оплодотворения ооцитов;
• оценивает развитие эмбрионов;
• обеспечивает оптимальные условия для культивирования;
• отбирает эмбрионы для переноса в полость матки и для криоконсервации;
• проводит вспомогательный хетчинг;
• делает биопсию эмбриона для проведения предимплантационной генетической диагностики – ПГД — (анализ проводится с целью выявления генетических болезней).
• подготавливает эякулят для искусственной внутриматочной инсеминации;
• проводит подготовку спермы и ее криоконсервацию для длительного хранения;
• замораживает эмбрионы, которые в дальнейшем используются в крио протоколах;
• размораживает половые клетки и эмбрионы;

Протокол культивирования эмбрионов. Эмбриологический протокол.

В процессе своей работы при каждом ЭКО эмбриолог заводит «Протокол культивирования эмбрионов». В него заносятся данные пациентов с момента получения ооцитов и спермы до момента переноса или криоконсервации эмбрионов: оценка полученных ооцитов в день пункции, данные спермограммы, метод оплодотворения, оценка оплодотворения и этапы развития каждого эмбриона до 6го дня. Такие протоколы помогают и репродуктологам и эмбриологам, чтобы в случае неудачной попытки правильно подготовить пациента к следующей и внести необходимые изменения в протокол. Мы по вашему запросу готовы предоставить данный протокол.

Пример Эмбриологического Протокола:

Расшифровка эмбриологического протокола:

Столбец 0 — это день пункции — день ноль. ООК — означает ооцит-кумулюсный комплекс.

• Для оплодотворения методом ЭКО: данная оценка осуществляется эмбриологом визуально. В этом случае нельзя со полной уверенность судить о зрелости ооцитов, так как для такого оплодотворения ооциты не очищаются от клеток кумулюса. Если ОКК выглядит плотным и темным, то он оценивается эмбриологом как «0». Если ОКК выглядит рыхлым и прозрачным, то он, как правило, содержит зрелый ооцит и получает оценку «1». Если на следующий день, после очистки ооцитов от клеток кумулюса и проверки оплодотворения, данный ооцит действительно был зрелым, то оценка выглядит как «1-1», если ооцит оказался не зрелым, то оценка будет «1-0».
• Для оплодотворения методом ИКСИ: данная оценка проводится через час после получения ОКК, которые обрабатываются ферментом, чтобы отделить ооциты от лишних клеток. В этом случае эмбриолог с уверенностью может говорить о количестве зрелых (пригодных для оплодотворения) ооцитов.
  • MII — Зрелый ооцит обозначается как
  • MI, GV – Не зрелые ооциты – для оплодотворения не подходят, ооциты стадии MI могут дозреть в чашке, но зиготы, полученные после такого оплодотворения, как правило, не дают хороших эмбрионов.
  • ABN – абнормальный ооцит – для оплодотворения не подходит. Может быть без оболочки, иметь включения в цитоплазме, неправильную форму и т.д. Может быть как зрелым так и не зрелым.
  • ATR – атретичный (дегенеративный) ооцит – для оплодотворения не подходит.

Только хорошие ооциты подходят для оплодотворения.

Далее эмбриолог следит за действием буквально по часам, т.к возможны разные аномальные варианты развития, которые в клинике обязательно отслеживают и культивируют отдельно. Через 16-18 часов после проведения оплодотворения в ооците появятся специфические округлые структуры – пронуклеусы. Это предшественники ядер, содержащие генетический набор как мамы, так и папы.

Столбец 1 – день проверки оплодотворения – день 1.

• 2PN – два пронуклеуса. Нормальное оплодотворение. Именно такие эмбрионы культивируют дальше.
• NF – пронуклеусов нет. В этом случае оплодотворение либо наступило, но пронуклеусы слишком быстро исчезли, что эмбриолог не успел их увидеть, либо ооцит просто не оплодотворился.
• 1PN – один пронуклеус. В 25% случаев при 1PN эмбрион может быть диплоидным.

Такие ооциты (NF, 1PN) откладываются в отдельныю капли и за ними также наблюдают. Если из такого ооцита получается отличный эмбрион, то вопрос о его переносе или заморозки решается совместное с репродуктологом, эмбриологом и пациентом.

• NS – ооцит не выжил после процедуры ИКСИ.
• 3PN и более. Это – аномальный эмбрион. Перенос такого эмбриона запрещен, так как приводит к замершей беременности с тяжелые последствиями. В клинике такие эмбрионы никогда не используют.

Дальнейшее развитие эмбриона, дробление, происходит в течение 6 дней.

Для культивирования эмбрионов в клинике используются передовые одноступенчатые среды, которые позволяют «оставить в покое» эмбрионы до 5го дня развития.

Через сутки эмбрион уже состоит из 6-8 бластомеров. До этого момента эмбрион развивался исключительно на материнских «запасах», накопленных в яйцеклетке за время ее роста и развития в яичнике. Однако если «генетическая программа», в которой закодированы этапы нормального развития эмбриона, содержит ошибки, эмбрион (4-19% случаев) останавливается в развитии не достигнув стадии бластоцисты – так называемый «блок развития». Это природный процесс отбора генетически нормальных эмбрионов.
Наиболее точная (эффективная) оценка эмбрионов происходит на стадии бластоцисты (5-6 день после оплодотворения). И если «лучшая» бластоциста выросла из «худшего» ооцита, максимальные шансы на успешное ЭКО будут все-таки у нее. Поэтому, уважаемые пациенты, не стоит узнавать ежедневно судьбу каждого эмбриончика. Наберитесь терпения, скоро все станет предельно ясно!
Эмбриологи используют численно–буквенную систему оценки качества, где первая цифра означает количество бластомеров, буква их качество, а вторая цифра оценка фрагментации:

• Тип A1 – эмбрион с равными бластомерами, отличного качества без ануклеарных (безъядерных) фрагментов (например, 4А1 – четырех клеточный «отличник»).
• Тип В2 – эмбрион хорошего качества с содержанием ануклеарных фрагментов до 20% (4В2)
• Тип С – эмбрион удовлетворительного качества с содержанием ануклеарных фрагментов от 21% до 50% (4С3)
• Тип D – эмбрион неудовлетворительного качества с содержанием ануклеарных фрагментов более 50% (4D4)

Столбец 5,6 – день переноса и/или криоконсервации – день 5 и 6

При классификации бластоцист в обозначении указывают:

• цифру (от 1 до 6) – она обозначает степень развития эмбриона:

1 – полость бластоцисты меньше, чем половина целого эмбриона
2 – полость бластоцисты больше, чем половина целого эмбриона
3 – полная бластоциста, полость заполняет почти весь эмбрион
4 – развитая бластоциста, полость включает весь эмбрион, тонкая оболочка
5 – бластоциста пробивается из оболочки
6 – бластоциста без оболочки

• первую букву (А, B, C), означающую качество внутриклеточной массы, из которой будет развиваться зародвш:

A – много клеток, плотно упакованные
B – несколько клеток, свободно сгруппированные
C – очень немного клеток

• вторую букву (А, B, C), которая обозначает качество трофэктодермы (TE), которая обеспечит прикрепление эмбриона к эндометрию и разовьется в плаценту:

A – много клеток, образуют единый слой
B – мало клеток, образуют свободный эпителий
C – очень мало крупных клеток

Репутация эмбрионов

И это еще не все. Существует такое понятие как «репутация эмбриона». Репутация эмбриона складывается из множества факторов, полученных в процессе наблюдения за их «поведением» с 1 по 6 день жизни. Учитывается все: какой эмбрион развивался лучше, какой быстрее дробился, как вел себя на каждом этапе – все это в итоге влияет на судьбу эмбриона. Поэтому иногда из двух эмбрионов с разными характеристиками, например, 5АА и 5АB, эмбриолог выбирает для пересадки второй эмбрион, с «неидеальными», казалось бы, показателями.

И еще немного об эмбриологии

• Существуют и дополнительные способы прогноза имплантации эмбриона (time-lapse, ПГС, анализ метаболитов и др.), которые дополняют морфологические критерии и обеспечивают в совокупности выбор лучшего эмбриона.
• При естественном оплодотворении эмбрион оказывается в матке только спустя 5 дней, поэтому, следуя природным стандартам, специалисты проводят подсадку на 5-е сутки.

ЭКО — процесс, к которому нужно подходить индивидуально, учитывая все нюансы, способные повлиять на его результат. Успех ЭКО во многом зависит от того, насколько специалистам удалось создать среду, схожую с естественными условиями, для развития и поддержать ее в течение 5-6 дней.

• Искусственное оплодотворение требует скрупулезности, перфекционизма и строгости в соблюдении всех стандартов работы. Поэтому лучшими эмбриологами становятся те, кто понимает степень своей ответственности.
• Также надо отметить, что качество эмбриона не имеет прямой связи с шансами и исходами беременности. На наступление и развитие беременности влияет очень много факторов. И каждый случай индивидуален.

В клинике используется PGD-диагностика, которая позволяет выбрать пол будущего ребенка (это важно в случаях передачи наследственных заболеваний по половому признаку), а также учесть хромосомные изменения.

Наша Клиника имеет Лицензию на выскотехнологичную медицинскую помощь, подразумевающую самое современное оборудование и высокий профессионализм врачей. Такое техническое совершенство крайне положительно влияет на повышение эффективности лечения.

Все помещения клиники и система Вашего обслуживания выстроены таким образом, чтобы соблюсти полную конфиденциальность. К тому же мы разработали и используем надежную систему защиты личной информации по каждому пациенту.

(812) 327-50-50
Санкт-Петербург
Садовая 35

Столбец 5,6 – день переноса и/или криоконсервации – день 5 и 6

Оценка качества ооцитов и эмбрионов

Все пациенты интересуются качеством полученных клеток, а в дальнейшем и качеством эмбрионов. Однако данный вопрос многофакторный и не имеет однозначного ответа. Начнем с начала. Первый вопрос, который задают пациенты, когда к ним в палату после процедуры забора ооцитов приходит эмбриолог, звучит всегда одинаково: «А клетки у меня хорошие?». Хочется сразу заметить, что на этот вопрос очень сложно ответить на данном этапе программы ВРТ. Первичная оценка ооцита основана на непосредственном визуальном анализе морфологии ооцит-кумулюсного комплекса. При получении ооцитов эмбриолог смотрит на клетки через бинокулярный микроском с незначительным уровнем увеличения. Выглядит это вот так:

В данной ситуации оценить детально качество ооцитов не представляется возможным. Эмбриолог может только делать предположения. Поэтому оценка ооцитов на этапе проведения трансвагинальной пункции яичников не проводится.

После забора ооцитов эмбриолог определяется с тем, каким методом проводить оплодотворение полученных клеток.

Метод оплодотворения выбирается на основании показателей мужского материала. Если показатели спермограммы снижены – выбирается метод ICSI. Суть его заключается в том, что эмбриолог очищает ооциты от клеток кумулюса и с помощью специальных инструментов, работая на специальном микроскопе, вводит морофологически хороший, активно-подвижный сперматозоид внутрь клетки. Перед тем как ввести сперматозоид в клетку, его обездвиживают. Данный метод оплодотворения предлагается также парам с бесплодием неясного генеза и пациентам, планирующим проведение преимлантационной генетической диагностики. Помимого этого, ИКСИ может быть проведено по желанию пациента.

При хороших показателях спермограммы проводится оплодотворение методом ЭКО. В чашке со специальной средой соединяют сперматозоиды и ооциты, а оплодотворение происходит естественным способом.

Итак, поговорим более подробно о зрелости и качестве ооцита.

Созревание ооцита до состояния, когда он способен к оплодотворению, происходит в процессе стимуляции суперовуляции, проводимой врачом гинекологом-репродуктологом. Не все ооциты в процессе стимуляции достигают зрелости.

• Способны оплодотворятся только ооциты, находящиеся в стадии метафазы 2 процесса мейоза. Их обозначают как М2.

Зрелый ооцит выглядит так

• Ооциты не достигшие зрелости имеют отличия от ооцита М2, которые эмбриолог способен увидеть только при выполнении оплодотворения методом ICSI. Незрелые ооциты имеют 2 вида: это клетка находящаяся в метафазе 1 мейоза (М1) и так называемый герминальный везикул (GV) ооциты в профазе I деления мейоза, определяемые по наличию зародышевого пузырька или ядерной оболочки в цитоплазме.

М1

При оплодотворении методом ЭКО такую оценку не проводят. Возможность оценить клетки в данной ситуации возникает только утром следующего дня, а в это время не всегда возможно понять, какими клетки были в момент пункции, т.к. они имеют возможность пройти процесс дозревания в условиях инкубатора.

Что такое качество ооцита

Качество ооцита характеризует внешний вид цитоплазмы, вителлинового слоя, полярного тельца. Гомогенная цитоплазма с однородным цветом и отсутствием гранулярности характеризует хорошее качество ооцита. Вакуоли, темная окраска, всевозможные включения, деформация или гранулярность расцениваются при морфологической оценке качества ооцита как негативные признаки.

Ооцит плохого качества , с гранулированной цитоплазмой и вакуолью большого размера в центре.

Оценка оплодотворения

Оценка оплодотворения проводится утром следующего за пункцией дня. Этот день считается 1-м днем эмбрионального развития.

Возможность понять, произошло ли оплодотворение клетки, появляется через 18 часов после оплодотвоерния и характеризуется формированием пронуклеусов. Эмбрион первых суток развития называется зиготой.

На этот день эмбриолог оценивает «правильность» оплодотворения. Нормально оплодотворившийся ооцит содержит 2 пронуклеуса. Все остальные варианты считаются отклонением.

Триплоидный эмбрион (3pn)

Аномально оплодотворившиеся эмбрионы исключаются из культивирования.

Оценка качества эмбрионов 2-3 дня развития

Начиная со вторых суток эмбрионального развития начинается фаза дробления.

Дробление — это синхронное быстрое деление эмбриона на равные крупные клетки. Эти клетки называются бластомерами. Оценка качества эмбриона производится по равномерности бластомеров. Чем более равномерные бластомеры содержит эмбрион, тем лучшим считается его качество. Оценку эмбрионов данных суток развития осуществляют по количеству бластомеров (обозначается цифрой) и по дополнительным критериям, таким как равномерность бластомеров и наличие фрагментации (оценивается латинскими буквами a,b,c,d и их комбинацией).

Эмбрион хорошего качества выглядит так.

4-е сутки эмбрионального развития

На 4-е сутки развития эмбрион человека состоит уже, как правило, из 16-18 клеток, межклеточные контакты постепенно уплотняются, и поверхность эмбриона сглаживается. Этот процесс называется компактизацией. Важно понимать, что до 3-х суток дробление эмбриона происходит механически, каждая клетка делится пополам, черпая энергию из запасов ооцита. Начиная с 4 суток эмбрионального развития начинается дифференциация клеток эмбриона, часть из них сформируют зародыш, остальные будут обеспечивать возможность имплантации и формирования плаценты.

На данном этапе эмбрионы наиболее чувствительны к отрицательным воздействиям.

Качество бластоцисты, которая сформируется из морулы, оценить практически невозможно.

Оценка качества морулы проводится по характеристикам компактизации:

А — эмбрион полностью компактизован. Клеточные мембраны видны нечетко.

В — компактизовано более 75% бластомеров. Эмбрион сохраняет сферичную форму и гладкую поверхность.

С — частичная компактизация (около 50% бластомеров).

D — компактизация менее 50% бластомеров. Различимы фрагменты и некомпактизовавшиеся бластомеры.

Морулы отличного качества

Морула плохого качества

Далее внутри морулы начинает формироваться полость. Когда эта полость достигает достигает 20% от ее объема, эмбрион называется бластоцистой. В норме формирование бластоцисты допускается с конца 4-х по середину 6-х суток развития, но чаще это происходит на 5-е сутки. В редких случаях возможно формирование бластоцисты к 7-м суткам эмбрионального развития.

Бластоциста состоит из двух популяций клеток, таких как: трофэктодерма (однослойный эпителий, окружающий полость) и внутренняя клеточная масса (плотное образование из клеток внутри бластоцисты). Из трофэктодермы сформируется в дальнейшем плацента и все зародошевые оболочки. Из внутренней клеточной массы будут формироваться все ткани и органы будущего ребенка. На данном этапе развития эмбрион оценивают по 3 критериям:по размеру полости, качеству трофэктодермы и качеству внутриклеточной массы.

Размер полости оценивают цифрой от 1-ого до 4-х. Внутриклеточную массу и трофэктодерму оценивают буквами от А до С. Первая буква в оценке качества будет относится к внутриклеточной массе, вторая – к качеству трофэктодермы. Если бластоциста успела совершить «хетчинг» (разрыв оболочки, окружающий эмбрион), такой бастоцисте присваивается цифра 5. Если же бластоциста успела полностью выбраться из оболочки после хетчинга, такую бластоцисту обозначат цифрой 6. Размер полости имеет меньшее значение в определении качества эмбриона, чем буквенная классификация. Ввиду того, что эмбрионы имеют индивидуальные особенности, они могут развиваться неравномерно. Любой размер полости определяется как вариант нормы. Буквенные обозначения следует понимать так: наивысшее качество оценивается буквой А, наихудший вариант развития внутриклеточной массы и трофэктодермы обозначается буквой С.

Важно понимать, что критерии оценки эмбрионов носят субъективный характер. Даже эмбрионы, оцененные по классификации как эбмрионы среднего и ниже среднего качества, могут дать полноценную беременность.

При оплодотворении методом ЭКО такую оценку не проводят. Возможность оценить клетки в данной ситуации возникает только утром следующего дня, а в это время не всегда возможно понять, какими клетки были в момент пункции, т.к. они имеют возможность пройти процесс дозревания в условиях инкубатора.

Оценка качества эмбрионов

Центральным звеном клиники ЭКО является эмбриологическая лаборатория. Для каждой попытки ЭКО заводится «Эмбриологический протокол», в котором отражается судьба каждого эмбриона от момента получения ооцитов и до момента переноса или замораживания.

Сразу после получения ооцитов и сперматозоидов производится их морфологическая оценка. По результатам анализа эякулята (спермограмме) принимают решение о способе оплодотворения – ЭКО или ИКСИ.

Описание: День 0. Непосредственно после пункции оценивают зрелость полученных ооцит-кумулюсных комплексов (ОКК). ОКК с прозрачным кумулюсом как правило содержит зрелый ооцит и получает оценку «1-1».При пункции возможно получение зрелых, незрелых, а также дегенеративных и разрушенных яйцеклеток. Точная оценка состояния ооцита возможна только после его очистки перед проведением ИКСИ.

В зрелых, готовых к оплодотворению ооцитах определяется первое полярное тельце. В эмбриологическом протоколе зрелый ооцит обозначают MII.

Если процесс созревания ооцита в фолликуле нарушен или неправильно введен триггер (ХГ), то существует большая вероятность получения незрелых клеток, обозначаемых – MI и GV (Рис.1). Возможна и полная дегенерация ооцита (Deg).

Рис 1. Ооциты, полученные при пункции яичников после удаления кумулюса (денюдации). А — MII, Б – MI, В – GV. Pb – полярное тельце, ZP – блестящая оболочка

Через 18-20 часов после добавления сперматозоидов или ИКСИ (1-е сутки) при нормальном оплодотворении образуются два пронуклеуса. Это предшественники ядер будущих клеток-бластомеров, на которые начинает делиться оплодотворенная яйцеклетка. При правильном оплодотворении оба пронуклеуса четко различимы. В этом случае им присваивают оценку 2pN. Если пронуклеусов не видно, что обычно связано с отсутствием оплодотворения, в протокол записывается 0pN. При неправильном оплодотворении возможно появление нескольких пронуклеусов, что отражается в записи, например 3pN, 6pN и т.д.(Рис2). «Неправильно» оплодотворенные ооциты не пригодны для дальнейшей работы и утилизируются.

Рис 2. Первый день развития in vitro – формирование зиготы и образование пронуклеусов. А – 2pN (нормальное оплодотворение) – два пронуклеуса Б – 3pN (аномальное оплодотворение) – больше, чем два пронуклеуса.

Дальнейшее развитие эмбриона, дробление, происходит в течение пяти-шести дней. Оценка качества эмбрионов проводится через 40-42 часа (2 сутки), 72-74 часа (3 сутки) и 120 часов (5 сутки) после оплодотворения. Дробление эмбриона должно быть симметричным (получаются бластомеры одинакового размера) и равномерным (все бластомеры претерпевают деление). Для наглядности эмбриологи используют численно – буквенную систему оценки качества, где цифра означает количество бластомеров, а буква их качество. Для обозначения эмбриона хорошего качества используется буквенный индекс «А», среднего «B», низкого «С». Возможны и промежуточные варианты, например АВ, ВА, ВС, СВ, когда сложно дать однозначную оценку (Рис3).

2-й день (4А) 3-й день (8А) 4-й день (comp)

Рис 3. Дробление эмбриона в течение первых трех суток in vitro и компактная морула на 4-й день развития. Представлены эмбрионы отличного (А) качества. B – бластомер ZP – блестящая оболочка.

Для второго дня культивирования перспективными считаются эмбрионы с четырьмя бластомерами — 4А, 4АВ, 4В. Для третьего — восьмиклеточные (8А, 8АВ, 8В). Эмбрионы плохого качества (ВС, СВ, С) как правило не переносят, оставляют до пятого дня и при формировании нормальной бластоцисты замораживают или переносят в матку. В случае неравномерного дробления (наличия бластомеров разной величины) потенциал эмбриона к имплантации снижен, и обозначается это приставкой «un», например 3Вun. Наличие фрагментов цитоплазмы обозначают «fr», например 8ВСfr (Рис.4). Оценивается и наличие вакуолей. При их визуализации ставится отметка «vac». В норме каждый бластомер несет одно ядро, если хотя бы в одном бластомере визуализируется больше одного ядра, это называется мультинуклеацией (mN) и указывает на значительную вероятность хромосомной патологии данного эмбриона.

Рис 4. Дробление эмбриона в течение первых трех суток in vitro. Представлены эмбрионы хорошего (ВА, В) и удовлетворительного (ВС) качества. Во втором ряду эмбрионы с неравномерным дроблением (3Bun и 4BAun).

К концу третьих и на четвертые сутки культивирования эмбрион начинает компактизацию (границы его клеток становятся неразличимы) и готовится к образованию бластоцисты. Его клетки могут быть частично (p.comp) или полностью компактизованы (comp) (Рис.5). Обычно оценка эмбрионов на четвертые сутки не проводится ввиду малой информативности данной стадии развития. Однако наличие компактизации на вторые сутки может свидетельствовать об аномальном развитии и обязательно должна отражаться в эмбриологическом протоколе.

Рис 5. Стадия компактизации 4-е сутки культивирования A – p.comp Б — comp

На пятые сутки, примерно через 120 часов после оплодотворения эмбрион образует бластоцисту (Bl) (Рис.6). Оценка качества бластоцист подразумевает ее размер, который отражается цифрами от 1 до 5; состояние внутренней клеточной массы (ВКМ) (от «A» до «С») и окружающих ее клеток – трофобласта (от «а» до «с»). Лучшими для переноса будут бластоцисты размера от 3 до 5, имеющие многоклеточную ВКМ и трофобласт – Bl4Aa, Bl4Ab. Бластоцисты среднего качества обозначаются как – Bl2Bb, Bl3Bb, а плохого – BlCc.

Рис 6. Бластоцисты на пятый день развития in vitro. e.bl – ранняя бластоциста, Bl3Ab – экспандированная бластоциста, Bl5Ab – бластоциста перед хетчингом, ВКМ – внутренняя клеточная масса.

Дальнейшее развитие эмбриона происходит уже в матке после имплантации. Для успешной имплантации бластоцисте необходимо выйти из окружающей ее блестящей оболочки. Данный процесс называется вылупление, или хетчинг. В случае, когда эмбриолог отмечает изменения блестящей оболочки и после криоконсервации эмбрионов процесс самостоятельного вылупления бластоцисты может быть затруднен и его возможно облегчить применяя вспомогательный хетчинг. В нашем центре мы используем наиболее эффективный лазерный вспомогательный хетчинг.

Самая высокая частота оплодотворения получена при переносе эмбрионов на стадии бластоцисты. Так, в нашем центре она составляет 53%. В то время, как при переносе на стадии 6-8 бластомеров – 47%.

Замораживание и ПГД также лучше всего выполнять на стадии бластоцисты. Однако, не все эмбрионы доходят до бластоцисты. Поэтому общепринятым считается следующий подход: если на 5 день культивирования имеется меньше 5 эмбрионов, как минимум один переносят, остальные оставляют до 5 дня. Из достигших бластоцисты еще один может быть перенесен (двойной перенос), остальные замораживают. Если на 3 день эмбрионов 5 и больше, их не переносят и оставляют культивировать до 5 дня. На 5 день одну, реже две бластоцисты переносят, остальные замораживают.

В заключение следует отметить, что описываемые морфологические критерии оценки качества эмбрионов являются основными, необходимыми, но не всегда достаточными для выбора эмбриона для переноса. Так, нередко после переноса эмбрионов высшего качества имплантация не наступает и, наоборот, бывают случаи наступления и успешного развития беременности при переносе эмбрионов плохого качества. Поэтому существуют дополнительные способы прогноза имплантации эмбриона (time-laps, ПГС, анализ метаболитов и др.), которые дополняют морфологические критерии и обеспечивают в совокупности выбор лучшего эмбриона.

Бластоциста в процессе хетчинга (выхода из блестящей оболочки для имплантации)

А – световая микроскопия HMC контраст Б – Сканирующая электронная микроскопия — ZP – блестящая оболочка TE – трофэктодерма ВКМ – внутренняя клеточная масса

Скидка 50% на первичный прием репродуктолога

Заполнив анкету для будущих родителей, вы сэкономите время врача на первичном приеме, поэтому он будет для вас стоить 50% от обычной цены.

	Здоровы ли дети, зачатые путем ЭКО?
	Что такое ПГД?
	Подробный алгоритм лечения бесплодия.
	Как понять за 1 минуту есть ли овуляция?

Все виды лечения бесплодия

Бесплодие – это не проблема, это задача.

• г. Москва, ул. 3-я Парковая, д.8/19 и д.12
• Пн-Сб: 09-20, Вс: 09-18

г.Москва, ул.3-я Парковая, д.8/19 и д.12 пн-сб 9-20 вс 9-18

Процесс оплодотворение яйцеклетки у женщин по дням: сроки, признаки.

Оценка качества эмбрионов при оплодотворении яйцеклетки у женщин по дням с поясняющими фотографиями.

Нажимая кнопку “Отправить заявку”, Вы даете согласие на обработку Ваших персональных данных в соответствии с условиями

Если процесс созревания ооцита в фолликуле нарушен или неправильно введен триггер (ХГ), то существует большая вероятность получения незрелых клеток, обозначаемых – MI и GV (Рис.1). Возможна и полная дегенерация ооцита (Deg).

Ответы про эмбрион

Когда эмбрион становится живым?
Относительно часто приходится слышать такой интересный вопрос. В ответ ожидается конкретное количество недель, месяцев или информация, что это происходит после рождения.
Эмбрион — это первая стадия развития животных и человека. До нее есть 2 половые клетки, которые содержат информацию о самце и самке, решивших совместить свои ДНК (а может, и не решивших, но так получилось в процессе секса).

Эмбрион с первого дня содержит информацию о своих родителях. То есть ему можно провести тест на отцовство или материнство. Набор генов уникален, и отличается между собой у эмбрионов от одной и той же пары родителей, и, конечно, отличатся от ДНК клеток женского и мужского организмов-предшественников.

Чтобы понять, живой он или нет, мы можем обратиться к биологии. Там есть некоторые представления о том, чем отличаются представители живой природы от неживой. Если коротко — если есть клетка, то есть и жизнь (или была). Но это именно об отличиях живого от неживого. Так даже клетка волоса будет представителем живой природы. Есть также понимание, что одна клетка волоса не является сама по себе организмом, только частью. И клетка, которая отделена от организма, погибает, оставаясь представителем живой природы и после гибели (прекращения обменных процессов, энергобмена, деления).

Организм — это система, пока она жив, нуждается в следующих процессах: питании, выделении, делении клеток (рост, замена старых).

Клетки эмбриона делятся, вначале питание он частично получается из запаса, который накопился в яйцеклетке, подпитываясь из окружающей среды — матки, выделительная система формируется позже.

Как понять, перед нами отдельный организм или часть другого организма?
Если организмы находятся на каком-то расстоянии и не имеют общих систем жизнеобеспечения (кровообращения, выделения, дыхания и т.п.), то с ними все понятно. А что же с эмбрионом? Может он — часть женщины? Ведь все его системы жизнеобеспечения связаны с организмом женщины. Еще 100 лет назад — это было предметом философских дискуссий. В наше время найден ответ — у всех клеток одного организма идентичная ДНК (с небольшими мутациями). Если клетки имеют другую ДНК, то это другой организм. У женской особи и эмбриона ДНК отличается на то количество генов, которое получено от мужской особи.

Эмбрион человека — человек?

Человек, с точки зрения биологии, — это представитель своего вида. Вообще других трактовок данного термина я не знаю. Если мы на ДНК тестирование отправим материал человека, собаки, лягушки биолог легко определит, к какому виду относится хозяин данной клетки, хозяин данного уникального ДНК-кода. Как думаете, что будет, если отправить клетку эмбриона на такое тестирование?

Когда у женщины произошла задержка, эмбрион уже есть?
У человека эмбрион получается в течение суток после овуляции (процесса выхода яйцеклетки из мешочка в яичнике-фолликула). Овуляция происходит за 2 недели до того, как должен начаться новый цикл. Если цикл 28 дней, то овуляция происходит на 14 день (+-1-2 дня). Если 35 — на 21 день(+-1-2 дня). То есть эмбрион существует 2 недели на момент задержки месячных.

Как развивается эмбрион?
Я очень коротко опишу самые интересные факты о развитии эмбриона человека. Сразу определимся с терминами. Сроки беременности в женской консультации и на УЗИ чаще всего ставят по последним месячным или с зачатия +2 недели. То есть в 1-2 недели беременности не было еще даже зачатия и самой беременности. Но я не буду использовать эти сроки — акушерские. Говорить будем про сроки с момента зачатия — эмбриональные. Отличие в сроках — 2 недели (акушерские 4 недели = 2 эмбриональные).
Сразу после зачатия происходит деление клетки. К 3 дню после слияния родительских клеток эмбрион состоит из 6-8 одинаковых клеток (морула).
К 5 дню клеток достаточно много, они начинают специализироваться (бластоциста). Некоторые из них — предшественники органов и систем эмбриона, некоторые — плаценты. Далее клетки-предшественники органов и систем специализируются на группы, подгруппы пока не станут зачатками определенной ткани/органа.

К 21-22 дню начинает формироваться нервная трубка (будущий спинной и головной мозг), начинает биться сердце. И при этом размер эмбриона 2 мм!
На 6 неделе внутриутробного развития начинают формироваться зачатки ног и рук. К 8,5 неделям (при размере эмбриона 38 мм) они будут иметь все части, которые присущи ноге и руке человека (заканчивается период закладки, продолжается период роста и развития).
В 5-8 недель активно развиваются мышцы, и параллельно им нервы и хрящи, которые позже станут костями.
Первые движения в ответ на толчок (двигательный рефлекс) различаются на сроке 8 недель: эмбрион откидывает голову назад, и сгибает туловище.
В 7-8 недель в крови матери можно найти клетки крови эмбриона. Что сейчас используется для диагностики генетических заболеваний эмбриона на ранних сроках.
С 8 недель считается, что закладка органов и систем окончена, продолжается их развитие и расширение функциональности. Именно после 8 недель от зачатия эмбрион начинают звать плодом. Так будет продолжаться до его рождения. Эти названия, конечно, условны и связаны с традициями медицинской практики.

Клетки эмбриона делятся, вначале питание он частично получается из запаса, который накопился в яйцеклетке, подпитываясь из окружающей среды — матки, выделительная система формируется позже.

http://embrylife.ru/eko_ekstrakorporalnoe_oplodotvorenie/embriologiya/http://nova-clinic.ru/otsenka-kachestva-ootsitov-i-embrionov/http://www.fertimed.ru/eko-vrt/ocenka-kachestva-embrionov.phphttp://www.b17.ru/article/embrion/

Давайте вместе будем делать материал еще популярнее, и после его прочтения сделаем репост в удобную для Вас социальную сеть

.