Девочки всем привет, как обычно делюсь с Вами своими советами и опытом молодой мамы, хочу рассказать о Как Делятся Эмбрионы И Что Способствует Этому?. Возможно некоторые детали могут отличаться, как это было у Вас. Всегда необходимо консультироваться у специалистов. Естетсвенно на обычные вопросы, обычно можно быстро найти профессиональный ответ на сайте. Пишите свои комменты и замечания, совместными усилиями улучшим и дополним, так чтобы все поняли как разобраться в том или ином вопросе.
Оценка качества эмбрионов для переноса при ЭКО: классификация и шансы на имплантацию
Результативность программ ЭКО зависит от многих факторов, главный из которых – эмбриологический. Искусственно оплодотворенные бластоцисты плохого качества редко имплантируются в матку, что снижает вероятность успеха процедуры. Именно поэтому важно тщательно подбирать клинику и следовать рекомендациям репродуктолога во время подготовки к проведению протокола.
Существуют критерии оценки качества бластоцист, отбираемых для подсадки в полость матки. По какому принципу их классифицируют, как они формируются и насколько хорошо приживаются?
Какие факторы влияют на характеристики эмбрионов при проведении ЭКО?
В протоколе ЭКО на получение качественных эмбрионов оказывают влияние:
Эмбриональные факторы, не подлежащие контролю со стороны специалистов. Это хромосомные аномалии, при которых бластоциста не приживается, отторгается маткой. Выявить подобные нарушения у Трехдневных или пятидневных эмбрионов помогает предимплантационная генетическая диагностика. На успех процедуры также оказывают влияние сбои в активации генома, что приводит к остановке деления клеток эмбриона на 3-и сутки. Чтобы избежать неудач при подсадке, бластоцисты подсаживают на 5-й день после оценки того, как морула делится в течение 2-х предыдущих дней.
Внешние причины (квалификация персонала, оснащенность лаборатории, плохо подготовленные среды для культивации, неправильный режим температуры и влажности).
Классы эмбрионов по качеству
Перенос эмбрионов производится на 3-и, чаще – 5-е сутки после слияния родительских гамет. Разработана классификация этих стадий развития. Для обозначения применяют специальную маркировку. Это индивидуальный набор букв (процент фрагментации – отделения от клеток фрагментов цитоплазмы, которые не несут генный материал) и цифр (число клеток эмбриона).
Трехдневные эмбрионы классифицируют по таблице качества:
Класс А: отличное качество
Класс B: хорошее качество
Класс C: среднее качество
Класс D: плохое качество
Нет безъядерных фрагментов
Фрагментация до 20%
Фрагментация 20-50%
Безъядерных клеток более 50%
Например, запись “4В” оценивают как четырехклеточный эмбрион хорошего качества с умеренной фрагментацией. Чем больше качественных эмбрионов получено в протоколе, тем лучше. Самые достойные (по мнению специалистов лаборатории) отбирают для подсадки, остальные замораживают для подстраховки. В случае неудачи их используют при новых попытках ЭКО, что позволяет избежать дополнительной гормональной стимуляции яичников.
Пятидневные бластоцисты маркируют комбинацией цифр и двойных букв:
Качество оценивают по размеру бластоцисты в баллах. Всего 6 баллов, где 1 – наиболее ранняя бластоциста, а 6 – с завершившимся процессом хетчинга.
Отсутствие дефектов и плотность обозначают, как и у трехдневных эмбрионов, буквами А, В, С, D. Бластоциста А – наилучшая по заявленному критерию.
Расположение клеток, отсутствие в них включений обозначается буквами А, В, С и D. Здесь А – эмбрион с плотными межклеточными связями и отсутствием включений.
Расшифровать обозначения несложно. Например, запись “1АВ” означает хороший эмбрион в стадии ранней бластоцисты с незначительными дефектами. Бластоцисты хорошего качества – 3АА, 4АА, 3АВ, 4АВ, среднего – 3АВ, 3ВВ, 4ВВ, 3ВС, 4ВВ, 2СС.
Каким образом при ЭКО происходит оценка качества эмбрионов?
Первый критерий отбора эмбриона – деление клеток яйцеклетки на два бластомера сразу после момента оплодотворения. Если этот факт зафиксировать не удалось, или образуется больше клеток, эмбрион считают некачественным.
Как репродуктологи оценивают хороший или плохой для имплантации эмбрион во время ЭКО? Для этого рассматриваются несколько критериев:
Вы соблюдаете назначения врача?
Да, они долго учились и многое знают.
48.03%
Нет, только советы бывалых мам.
14.47%
Соблюдаю, но думаю перед тем как принимать что либо.
37.5%
Проголосовало: 152
внешний вид – клетки должны быть правильной формы и одинаковыми по объему, а их внешняя оболочка не может иметь утолщений;
включения – вакуоли и другие клеточные структуры считаются неблагоприятным признаком, в этом случае зиготы могут не вступать в стадию дробления, или происходит разрушение клеток;
соответствие количества клеток дню развития, равномерность их деления (хорошо, если промежуток между тремя и четырьмя клетками короткий – это свидетельствует о том, что бластомеры на стадии двух клеток поделились равномерно);
отношение безъядерных клеток к нормальным в процентах (фрагментация 25% и ниже – вариант нормы, при превышении этого показателя эмбрионы культивируют до 5 суток, у них также есть шансы на удачную имплантацию).
Способы улучшения качества эмбрионов при проведении ЭКО
Качество бластоцист, полученных в лабораторных условиях, зависит от полноценности родительских половых клеток. На их здоровье влияет множество факторов:
внешние: плохая экология, стрессы, радиация, регулярная смена часовых поясов, работа на вредном производстве;
внутренние: избыток или недостаток массы тела, прием гормонов для стимуляции овуляции, ослабленный иммунитет, нездоровый образ жизни, заболевания репродуктивной системы, при которых может ухудшиться качество ооцитов, возраст 35 лет и более;
правильная подготовка к ЭКО: родителям следует пройти рекомендованные репродуктологами обследования.
Все это значит, что для улучшения качества эмбрионов будущим родителям следует позаботиться о собственном здоровье и самочувствии. Подготовку к ЭКО следует начинать за 2-3 месяца до сбора биоматериала, поскольку мужские половые клетки созревают около 70 суток.
Важно соблюдать следующие условия:
исключить проживание в неблагоприятных с экологической точки зрения районах;
избегать стрессовых ситуаций;
правильно питаться: в меню должны быть диетические, легко усваиваемые блюда, белковые продукты (вегетарианство снижает качество половых клеток);
исключить вредные привычки;
скорректировать вес.
Вероятность имплантации эмбрионов разного качества
Использование качественных эмбрионов повышает успех ЭКО, однако их отбор по классификации не всегда играет решающую роль. Протокол считается удачным, если 40% оплодотворенных эмбрионов достигли бластоцисты хорошего качества. Однако и при полученных эмбрионах плохого качества факт беременности не стоит исключать. Известны случаи, когда перенос первоклассных бластоцист заканчивался неудачей, а подсадка эмбрионов третьего класса вела к успешному приживлению и вынашиванию здоровых малышей.
Они характеризуются круглой формой, идентичной структурой, потенциалом развития и биохимией. У бластоцист существует одна очень значимая функция – тотипотентность, что означает возможность создавать различные живые клетки. Следует учесть, что на этапе 8 бластомеров эта функция исчезает. В дальнейшем бластомеры приобретают другое свойство – специализацию. Этим объясняется тот факт, что любое травмирование эмбриона, полученное на стадии 8 бластомеров, без труда пропадает. Как правило, в эти же сроки эмбрион может разделиться на 2-3 части, в результате чего развиваются однояйцевые близнецы.
Дробление эмбрионов осуществляется и в дальнейшем, клетки внешней оболочки морулы превращаются в эпителий, активно способствуя наполнению межклеточного пространства ионами и водой. В итоге внутри образуется особая полость, которая называется бластоцелью. И с этого момента эмбрион, полученный в результате ЭКО или ИКСИ, обретает новое обозначение – бластоциста или бластула.
Качество эмбрионов, полученных при экстракорпоральном оплодотворении
класс 1 (А) — отлично
— максимальная скорость дробления;
— отсутствие фрагментов без ядер;
— бластомеры идеальной формы;
— отличная способность к имплантации в процессе ЭКО.
На картинке: 1)двухклеточный эмбрион 1-го класса;
2) четырёххклеточный эмбрион 1-го класса;
3) пятиклеточный эмбрион 1-го класса;
4)восьмиклеточный эмбрион 1-го класса;
5)двенадцатиклеточный эмбрион 1-го класса.
класс 2 (В) — хорошо
— бластомеры, полученные в результате оплодотворения яйцеклетки, неровной формы, либо присутствие фрагментов цитоплазмы также неровной формы, при их количестве не более 10% от общего объёма;
— отличная способность к имплантации.
1)двухклеточный эмбрион 2-го класса;
2) пятиклеточный эмбрион 2-го класса;
3) четырёххклеточный эмбрион 2-го класса;
4)восьмиклеточный эмбрион 2-го класса.
класс 3 (С) – удовлетворительно
— фрагментация, составляющая от 10 до 50% от общего объёма
1) шестиклеточный эмбрион 3-го класса;
2) восьмиклеточный эмбрион 3-го класса.
класс 4 (D) — неудовлетворительно
— фрагментация, составляющая более 50% от общего объёма
Стадии развития эмбриона и скорость их роста
2-е сутки После выполнения пункции, эмбрион, полученный в результате оплодотворения яйцеклетки, достигает стадии 2-4 –х бластомеров ( в некоторых случаях — 6-8 бластомеров);
1)нормальное оплодотворение яйцеклетки;
2)патологическое оплодотворение яйцеклетки.
Проще всего осуществить выбор эмбрионов на вторые сутки после пункции, выполненной в процессе программы ЭКО. К этому моменту явно видно, какие эмбрионы замедляются в развитии, а какие и вовсе его прекращают.
3-4 е сутки 6-8 бластомеров (в некоторых случаях — 8-16); Когда эмбрион, полученный в результате искусственного оплодотворения, достигает стадии 12-14 бластомеров, он меняет форму на шаровидную. Контуры приобретают гладкую поверхность. Это происходит, благодаря тому, что межклеточные контакты у бластомеров становятся мощнее. С данного момента бластомер называют морулой. Если сравнивать с естественными условиями, то, как раз на этой стадии, эмбрион оказывается в матке.
5-е сутки Бластоциста (16 бластомеров и более); Бластоциста покидает zona pellucida, далее наступает очередь естественного хэтчинга. К этому времени поверхность максимально растягивается, и, соответственно становится очень тонкой. Образуется небольшое отверстие, через которое бластоциста и выходит за пределы zona pellucida. Наступает новая стадия – стадия имплантации бластоцисты. (см фото ниже).
Благодаря тому, что эмбрион можно культивировать до стадии бластоцисты, у эмбриологов, работающих в центре по лечению бесплодия, расширяются возможности для выбора наиболее качественных экземпляров. К тому же и сам процесс перемещения эмбриона в матку в процессе экстракорпорального оплодотворения становится более физиологичным, что благоприятно сказывается на результате имплантации, и, соответственно, на успехе ЭКО.
Выбор оптимального момента для подсадки эмбриона
Как правило, в клиниках по лечению бесплодия практикуется подсадка эмбриона на вторые или третьи сутки после культивирования. На практике не было выявлено существенного влияния на результат беременности при переносе на вторые или на третьи сутки. Момент выбирают, исходя из анализа интенсивности, а также равномерности дробления эмбрионов. В случае, если на вторые сутки выбор сделать не получается – подсадка выполняется на следующий день.
Пациентке советуют предварительно позвонить в центр по лечению бесплодия и уточнить, как происходит оплодотворение яйцеклетки. Врач сообщает, когда ей следует подойти для процедуры переноса эмбрионов в матку.
Оптимальное количество эмбрионов, рекомендуемое для переноса
Как показывает практика, при экстракорпоральном оплодотворении лучше всего переносить в полость матки максимум два эмбриона, при условии, что оба отличаются высоким качеством. Если же качество эмбрионов вызывает сомнения, возможна пересадка трёх эмбрионов.
Некоторые центры по лечению бесплодия практикуют в процессе ЭКО перенос четырёх, и даже пяти эмбрионов. Окончательное решение в этом случае за эмбриологом. Но в последнее время всё больше известных специалистов – как отечественных, так и зарубежных – рекомендуют не подсаживать более 3-х эмбрионов. Ведь, как правило, чаще всего все эмбрионы или приживаются, или погибают.
Подсадка в полость матки большого количества эмбрионов резко увеличивает риск развития в процессе экстракорпорального оплодотворения многоплодной беременности. Поэтому постарайтесь обсудить этот вопрос с вашим доктором.
2)патологическое оплодотворение яйцеклетки.
Эмбриологический протокол
Центральным звеном клиники «ЭмбриЛайф» является эмбриологическая лаборатория. Здесь сконцентрировано множество сложнейшей техники, которая помогает воссоздать естественные условия для развития эмбрионов. Но даже эта современная техника будет бессильна без соответствующего штата опытных эмбриологов.
Эмбриолог «ЭмбриЛайф»занимается:
подготовкой половых клеток к оплодотворению;
выбирает качественные гаметы для ИКСИ;
получает ооциты во время пункции фолликулов;
проводит непосредственно оплодотворение одним из выбранных методов (стандартное ЭКО, ИКСИ);
работает со сложным мужским фактором – выделяет сперматозоиды из биоптата яичка (TESA, TESE) и использует их для оплодотворения ооцитов;
оценивает развитие эмбрионов;
обеспечивает оптимальные условия для культивирования;
отбирает эмбрионы для переноса в полость матки и для криоконсервации;
проводит вспомогательный хетчинг;
делает биопсию эмбриона для проведения предимплантационной генетической диагностики – ПГД — (анализ проводится с целью выявления генетических болезней).
подготавливает эякулят для искусственной внутриматочной инсеминации;
проводит подготовку спермы и ее криоконсервацию для длительного хранения;
замораживает эмбрионы, которые в дальнейшем используются в крио протоколах;
В процессе своей работы при каждом ЭКО эмбриолог заводит «Протокол культивирования эмбрионов». В него заносятся данные пациентов с момента получения ооцитов и спермы до момента переноса или криоконсервации эмбрионов: оценка полученных ооцитов в день пункции, данные спермограммы, метод оплодотворения, оценка оплодотворения и этапы развития каждого эмбриона до 6го дня. Такие протоколы помогают и репродуктологам и эмбриологам, чтобы в случае неудачной попытки правильно подготовить пациента к следующей и внести необходимые изменения в протокол. Мы по вашему запросу готовы предоставить данный протокол.
Пример Эмбриологического Протокола:
Расшифровка эмбриологического протокола:
Столбец 0 — это день пункции — день ноль. ООК — означает ооцит-кумулюсный комплекс.
Для оплодотворения методом ЭКО: данная оценка осуществляется эмбриологом визуально. В этом случае нельзя со полной уверенность судить о зрелости ооцитов, так как для такого оплодотворения ооциты не очищаются от клеток кумулюса. Если ОКК выглядит плотным и темным, то он оценивается эмбриологом как «0». Если ОКК выглядит рыхлым и прозрачным, то он, как правило, содержит зрелый ооцит и получает оценку «1». Если на следующий день, после очистки ооцитов от клеток кумулюса и проверки оплодотворения, данный ооцит действительно был зрелым, то оценка выглядит как «1-1», если ооцит оказался не зрелым, то оценка будет «1-0».
Для оплодотворения методом ИКСИ: данная оценка проводится через час после получения ОКК, которые обрабатываются ферментом, чтобы отделить ооциты от лишних клеток. В этом случае эмбриолог с уверенностью может говорить о количестве зрелых (пригодных для оплодотворения) ооцитов.
MII — Зрелый ооцит обозначается как
MI, GV – Не зрелые ооциты – для оплодотворения не подходят, ооциты стадии MI могут дозреть в чашке, но зиготы, полученные после такого оплодотворения, как правило, не дают хороших эмбрионов.
ABN – абнормальный ооцит – для оплодотворения не подходит. Может быть без оболочки, иметь включения в цитоплазме, неправильную форму и т.д. Может быть как зрелым так и не зрелым.
ATR – атретичный (дегенеративный) ооцит – для оплодотворения не подходит.
Только хорошие ооциты подходят для оплодотворения.
Далее эмбриолог следит за действием буквально по часам, т.к возможны разные аномальные варианты развития, которые в клинике обязательно отслеживают и культивируют отдельно. Через 16-18 часов после проведения оплодотворения в ооците появятся специфические округлые структуры – пронуклеусы. Это предшественники ядер, содержащие генетический набор как мамы, так и папы.
Столбец 1 – день проверки оплодотворения – день 1.
2PN – два пронуклеуса. Нормальное оплодотворение. Именно такие эмбрионы культивируют дальше.
NF – пронуклеусов нет. В этом случае оплодотворение либо наступило, но пронуклеусы слишком быстро исчезли, что эмбриолог не успел их увидеть, либо ооцит просто не оплодотворился.
1PN – один пронуклеус. В 25% случаев при 1PN эмбрион может быть диплоидным.
Такие ооциты (NF, 1PN) откладываются в отдельныю капли и за ними также наблюдают. Если из такого ооцита получается отличный эмбрион, то вопрос о его переносе или заморозки решается совместное с репродуктологом, эмбриологом и пациентом.
NS – ооцит не выжил после процедуры ИКСИ.
3PN и более. Это – аномальный эмбрион. Перенос такого эмбриона запрещен, так как приводит к замершей беременности с тяжелые последствиями. В клинике такие эмбрионы никогда не используют.
Дальнейшее развитие эмбриона, дробление, происходит в течение 6 дней.
Для культивирования эмбрионов в клинике используются передовые одноступенчатые среды, которые позволяют «оставить в покое» эмбрионы до 5го дня развития.
Через сутки эмбрион уже состоит из 6-8 бластомеров. До этого момента эмбрион развивался исключительно на материнских «запасах», накопленных в яйцеклетке за время ее роста и развития в яичнике. Однако если «генетическая программа», в которой закодированы этапы нормального развития эмбриона, содержит ошибки, эмбрион (4-19% случаев) останавливается в развитии не достигнув стадии бластоцисты – так называемый «блок развития». Это природный процесс отбора генетически нормальных эмбрионов. Наиболее точная (эффективная) оценка эмбрионов происходит на стадии бластоцисты (5-6 день после оплодотворения). И если «лучшая» бластоциста выросла из «худшего» ооцита, максимальные шансы на успешное ЭКО будут все-таки у нее. Поэтому, уважаемые пациенты, не стоит узнавать ежедневно судьбу каждого эмбриончика. Наберитесь терпения, скоро все станет предельно ясно! Эмбриологи используют численно–буквенную систему оценки качества, где первая цифра означает количество бластомеров, буква их качество, а вторая цифра оценка фрагментации:
Тип A1 – эмбрион с равными бластомерами, отличного качества без ануклеарных (безъядерных) фрагментов (например, 4А1 – четырех клеточный «отличник»).
Тип В2 – эмбрион хорошего качества с содержанием ануклеарных фрагментов до 20% (4В2)
Тип С – эмбрион удовлетворительного качества с содержанием ануклеарных фрагментов от 21% до 50% (4С3)
Тип D – эмбрион неудовлетворительного качества с содержанием ануклеарных фрагментов более 50% (4D4)
Столбец 5,6 – день переноса и/или криоконсервации – день 5 и 6
При классификации бластоцист в обозначении указывают:
цифру (от 1 до 6) – она обозначает степень развития эмбриона:
1 – полость бластоцисты меньше, чем половина целого эмбриона 2 – полость бластоцисты больше, чем половина целого эмбриона 3 – полная бластоциста, полость заполняет почти весь эмбрион 4 – развитая бластоциста, полость включает весь эмбрион, тонкая оболочка 5 – бластоциста пробивается из оболочки 6 – бластоциста без оболочки
первую букву (А, B, C), означающую качество внутриклеточной массы, из которой будет развиваться зародвш:
A – много клеток, плотно упакованные B – несколько клеток, свободно сгруппированные C – очень немного клеток
вторую букву (А, B, C), которая обозначает качество трофэктодермы (TE), которая обеспечит прикрепление эмбриона к эндометрию и разовьется в плаценту:
A – много клеток, образуют единый слой B – мало клеток, образуют свободный эпителий C – очень мало крупных клеток
Репутация эмбрионов
И это еще не все. Существует такое понятие как «репутация эмбриона». Репутация эмбриона складывается из множества факторов, полученных в процессе наблюдения за их «поведением» с 1 по 6 день жизни. Учитывается все: какой эмбрион развивался лучше, какой быстрее дробился, как вел себя на каждом этапе – все это в итоге влияет на судьбу эмбриона. Поэтому иногда из двух эмбрионов с разными характеристиками, например, 5АА и 5АB, эмбриолог выбирает для пересадки второй эмбрион, с «неидеальными», казалось бы, показателями.
И еще немного об эмбриологии
Существуют и дополнительные способы прогноза имплантации эмбриона (time-lapse, ПГС, анализ метаболитов и др.), которые дополняют морфологические критерии и обеспечивают в совокупности выбор лучшего эмбриона.
При естественном оплодотворении эмбрион оказывается в матке только спустя 5 дней, поэтому, следуя природным стандартам, специалисты проводят подсадку на 5-е сутки.
ЭКО — процесс, к которому нужно подходить индивидуально, учитывая все нюансы, способные повлиять на его результат. Успех ЭКО во многом зависит от того, насколько специалистам удалось создать среду, схожую с естественными условиями, для развития и поддержать ее в течение 5-6 дней.
Искусственное оплодотворение требует скрупулезности, перфекционизма и строгости в соблюдении всех стандартов работы. Поэтому лучшими эмбриологами становятся те, кто понимает степень своей ответственности.
Также надо отметить, что качество эмбриона не имеет прямой связи с шансами и исходами беременности. На наступление и развитие беременности влияет очень много факторов. И каждый случай индивидуален.
В клинике используется PGD-диагностика, которая позволяет выбрать пол будущего ребенка (это важно в случаях передачи наследственных заболеваний по половому признаку), а также учесть хромосомные изменения.
Наша Клиника имеет Лицензию на выскотехнологичную медицинскую помощь, подразумевающую самое современное оборудование и высокий профессионализм врачей. Такое техническое совершенство крайне положительно влияет на повышение эффективности лечения.
Все помещения клиники и система Вашего обслуживания выстроены таким образом, чтобы соблюсти полную конфиденциальность. К тому же мы разработали и используем надежную систему защиты личной информации по каждому пациенту.
(812) 327-50-50 Санкт-Петербург Садовая 35
1 – полость бластоцисты меньше, чем половина целого эмбриона 2 – полость бластоцисты больше, чем половина целого эмбриона 3 – полная бластоциста, полость заполняет почти весь эмбрион 4 – развитая бластоциста, полость включает весь эмбрион, тонкая оболочка 5 – бластоциста пробивается из оболочки 6 – бластоциста без оболочки
Оценка качества эмбрионов в программах ЭКО
Хотите узнать мнение врача? Рассказывает врач репродуктолог, акушер-гинеколог Утишева Екатерина Валерьевна
Несмотря на то что результативность программ ЭКО зависит от множества факторов, главным и решающим этапом, практически определяющим успешность программы, является эмбриологический.
Оглавление
А так как различные манипуляции с эмбрионом человека – это передний край современной науки, можете представить себе сложность терминологии, которую используют эмбриологи в своей повседневной деятельности.
Ясности не добавляет и обилие различных классификаций и методов оценки качества используемых клеток.
Мы постараемся доступным языком объяснить, что подразумевается под непонятными сочетаниями букв и цифр и дать понимание того, на основе каких данных врачи принимают решения и дают прогнозы на исход программ ЭКО.
Хотим сразу предупредить — ни в коем случае не стоит забывать, что для того, чтобы самостоятельно оценить перспективы и принять решение о переносе эмбриона нужно быть настоящим специалистом, имеющим помимо специального образования достаточный опыт. В каждом конкретном случае решение и прогноз основывается на совокупности всех известных данных и чаще всего является коллективным решением врача и эмбриолога.
Главная сложность состоит в том, что каждому этапу развития эмбриона соответствует своя система оценки качества и способ записи этой оценки. И для того чтобы понимать обозначения вроде «8с» необходимо хотя бы немного разобраться в содержании этих этапов и сопутствующих терминах.
День первый
На первом этапе эмбриолог оценивает признаки оплодотворения после проведенной процедуры ЭКО, ИКСИ, ИМСИ или PICSI. На этом этапе в эмбрионе оценивают наличие, количество, симметричность, внутреннее строение и внешний вид пронуклеусов.
Пронуклеусы — это ядра мужской и женской половых клеток еще не слившихся и несущих одинарный набор хромосом. По их количеству и внешнему виду оценивают жизнеспособность эмбриона и перспективы возникновения патологий.
В норме их должно быть два, они должны иметь относительно равные размеры, находиться рядом и иметь внутри «ядрышки» — пронуклеоли тоже в определенном количестве и расположенные определенным образом.
На этом этапе может формироваться множество патологий, например, при присутствии только одного пронуклеуса оплодотворение и не сможет произойти, ведь именно это образование и есть носитель генетического материала, а без участия противоположного пола размножаться мы еще не научились.
Пронуклеусов может оказаться и три. Такие эмбрионы часто несут аномальный, тройной набор хромосом и нежизнеспособны. Обычно они погибают до имплантации (прикрепления к стенке матки) или приводят к замершей беременности. Такие эмбрионы отбраковываются и не используются в программах ЭКО.
День второй
Вторые сутки знаменуются соединением ядер женской гаметы и мужской, а также процессом дробления зиготы, которая на этой стадии становится эмбрионом. Численность бластомеров (эмбриональных клеток) – 2–4, но их объем не увеличивается.
Дробление эмбрионов оценивается специалистом по таким критериям:
количество эмбриональных клеток;
форма, строение, размеры;
симметричность деления;
скорость дробления;
число ядер в бластомерах. В норме бластомеры одноядерные, при патологиях возникает мультинуклеация (более одного ядра), что, скорее всего, свидетельствует о хромосомном нарушении у эмбриона;
отклонения в цитоплазме (содержимое клетки);
наличие участков цитоплазмы, неимеющих ядер (фрагментация). Чем выше степень фрагментации, тем больше рисков, что эмбрион далее будет развиваться. На сегодняшний день до конца непонятно, почему происходит фрагментация, которая встречается в программах ЭКО довольно часто: является ли это следствием стимуляции или это характерная особенность эмбрионального развития.
Максимальной имплантационной способностью обладают эмбрионы с регулярной формой бластомеров, отсутствием фрагментации, нормальной скоростью деления.
Уровень фрагментации и численность бластомеров классифицируется по типам следующим образом:
А – высококачественный эмбрион без фрагментированных бластомеров;
В – среднекачественный эмбрион, фрагментация составляет менее 20%;
С – удовлетворительное качество эмбриона, фрагментация составляет 21–50%.
Самый качественный эмбрион — 4А, где 4 — количество бластомеров, А — отсутствие фрагментации.
День третий
Продолжается дробление эмбриона, у которого насчитывается от 4 до 9 бластомеров. В начале третьего дня развития запускается собственная генетическая программа, которая в некоторых случаях содержит «опечатки». До этого эмбрион для своего роста «пользуется» веществами, накопленными яйцеклеткой во время ее созревания.
Если эмбрион имеет мутации в программе («блок развития»), то далее он не развивается. Это происходит примерно в 20% случаях.
Причиной «блока развития» может быть низкокачественная семенная жидкость или яйцеклетка. Изначальное неудовлетворительное развитие эмбриона свидетельствует о проблемах с яйцеклеткой, если эмбрион «страдает» с третьих суток культивирования, то сперма была ненадлежащего качества.
«Блок развития» – это так называемый естественный отбор, эволюционный спасительный механизм, который останавливает развитие некачественных эмбрионов. Как в дальнейшем будет развиваться и расти эмбрион зависит от сформированного генома и своевременности начала его функционирования.
Мы постараемся доступным языком объяснить, что подразумевается под непонятными сочетаниями букв и цифр и дать понимание того, на основе каких данных врачи принимают решения и дают прогнозы на исход программ ЭКО.
Стадии развития эмбриона в ЭКО до переноса: особенности развития в искусственных условиях
Успех экстракорпорального оплодотворения зависит не только от состояния будущей мамы, но и от качества яйцеклеток. Стадии развития эмбриона в ЭКО до переноса контролируются по дням. Это позволяет заметить нарушения деления и отсеять некачественных зародышей.
Стадия зиготы – ооцита
День получения яйцеклеток считают нулевым, от него начинают дальнейший отсчет. Ооциты могут находиться в одной из трех стадий развития:
GV – это незрелые клетки с хорошо различимым ядром. Количество ДНК в них 4С, оно должно уменьшиться путем расформирования лишних хромосом в полярные тельца. В норме должно остаться 1С, чтобы слиться с таким же количеством генетического материала сперматозоида.
MI – незрелые ооциты. В них происходит растворение оболочки ядра, но количество ДНК еще не уменьшено. Первые две стадии оставляют для дозревания до третьей и проводят ИКСИ.
MII – зрелый ооцит. В нем находится 2С ДНК, но половина хромосом вытеснена в полярное тельце. От него яйцеклетка избавится после оплодотворения.
На этой стадии эмбриона используется среда G1, которая питает его до размера 8 клеток. Проникновение сперматозоида к ооциту через 4-7 часов приводит к вытеснению лишнего генетического материала, формируется зигота.
В клетке остается ДНК матери и отца, через несколько часов происходит формирование 2 пронуклеусов. иногда образуются аномальные формы с 1 или 3 и более пронуклеусами. Такие клетки отбраковывают.
Через 5-10 часов оболочки пронуклеусов растворяются, и появляется одна митотическая пластинка – выстроенное в ряд родительское ДНК. Через 3-4 часа начнется первое деление.
Стадия бластомеров
На 2-4 сутки происходит дробление зиготы, образуются бластомеры. Сначала клетка делится пополам, затем каждая из полученных – снова пополам. Но деление происходит несинхронно, поэтому эмбриолог может заметить нечетное количество бластомеров.
В период дробления стадию определяют по числу клеток. Для оценки качества будущего эмбриона учитывают следующие показатели:
размер и форма;
количество ядер, в норме – в каждом бластомере по одному;
состояние цитоплазмы: вакуоли (vac), грануляция (gra), скопление органелл (serr), вредные вещества (rb) – плохие признаки;
процент фрагментации – количество безъядерных структур, в норме составляет не более 10%.
По итогам осмотра эмбриолог дает оценку и решает, какие зиготы перспективны в дальнейшем развитии.
Стадия компактизации эмбриона
На 3 сутки после оплодотворения начинается процесс компактизации. У бластомеров возникают отростки, которые помогают им плотно зацепиться за соседние клетки, установить контакт. Это происходит за счет специфических белков и ионов кальция.
Постепенно клетки распластываются, формируется цитоскелет. Если на этом этапе в среде будет недостаточно кальция, то зародыш раскомпактизуется. В противном случае образуется морула – это зародыш на стадии компактизации.
Эмбрион на стадии морулы
Постепенно морула теряет зависимость от кальция. Но ее качество оценить тяжело. На электронных снимках клетки выглядят сглаженными, их число определить практически невозможно.
На стадии морулы у хорошего зародыша имеется не менее 8 клеток. Она приобретает ровную сферическую форму, без различных выступов и впадин. Плохой прогноз – наличие вакуолей и фрагментация.
Эмбрион на стадии кавитации
С конца 4- начала 5 суток морула переходит в стадию кавитации. Развитие эмбриона на стадии mcav предполагает появление полости, которая делит его на две части:
Трофобласт.
Внутренняя часть клеток.
Полость образуется за счет закачивания в нее жидкости. Это переходный момент, после которого можно сказать, что морула стала бластоцистой.
Эмбрион на стадии бластоцисты
За счет увеличения объема жидкости, начинает увеличиваться объем полости. Через какое время морула переходит в бластоцисту, определяется индивидуально. Процесс может длиться до 12 часов.
На этой стадии бластоцисте присваивают буквенно-числовое обозначение, характеризующее три паратметра:
цифра от 1 до 6 обозначает стадию развития;
буквы от А до С – качество внутриклеточной массы;
вторая буква А, В или С – состояние трофоэктодермы.
Например, эмбрион 4вв стадии – это зародыш среднего качества, который имеет шансы на имплантацию.
Оценка качества зародышей необходима, чтобы врач мог определиться со сроком подсадки, а при использовании витрифицированных эмбрионов – временем разморозки. В некоторых случаях необходима досрочная разморозка и доращивание зародышей.
Стадии развития эмбриона при ЭКО по дням: таблица
Для удобства определения стадии развития зародыша до подсадки, можно воспользоваться таблицей.
Процессы в зародыше
Слияние ооцита и сперматозоида
Дробление, образование бластомеров
Продолжение кавитации, рост бластоцисты
На какой стадии развития эмбриона осуществляют перенос?
Выбор срока для подсадки определяется механизмами развития клеток:
В первые сутки переноса избегают. На этом этапе сложно оценить качество зародышей, а условия матки не физиологичны для них. При естественном наступлении беременности зигота в 1 сутки находится в маточной трубе.
На 2 сутки уже можно предположить, какой из эмбрионов более качественный, некоторые останавливают свое развитие. Серьезные генетические отклонения еще не проявляют себя, поэтому подсадку не проводят.
На 3 сутки у эмбриона больше шансов прижиться. Но провести предимплантационную диагностику еще нельзя. При достаточном количестве оплодотворенный яйцеклеток чаще всего на этой стадии делают подсадку. Лишние эмбрионы можно криоконсервировать. Многим женщинам предлагают заморозить морулу на стадии mkv.
На 4 сутки – физиологичный срок, но невозможно посчитать количество клеток и оценить состояние эмбриона. Многие до стадии морулы не доживают.
5 сутки – выживают наиболее качественные бластоцисты, частота имплантации на этой стадии доходит до 50%.
Что лучше для переноса – морула или бластоциста?
Единого мнения о том, делать подсадку эмбриона на стадии компактизации или бластоцисты, нет. Оптимальный срок подбирается индивидуально. Морула на 4 сутки – наиболее физиологичный вариант. На этой стадии эмбрион проникает в матку при естественном наступлении беременности. Но оценить качество морулы не всегда возможно из-за сглаженного вида клеток.
До 5 суток в искусственных условиях выживают наиболее сильные эмбрионы. Подсадка на этой стадии дает результат в 2 раза лучше, чем при пересадке 3-дневных зародышей. Но до состояния бластоцисты доживают немногие.
Репродуктологи руководствуются количеством и качеством эмбрионов на 2-3 сутки. Если их 3-4 и более, то есть возможность подрастить до состояния бластоцисты и выбрать более качественных. При наличии 2-3 морул подсадку делают на 3 сутки. Даже при среднем качестве зародышей условия материнского организма более благоприятные, чем искусственные питательные среды.
Юлия Шевченко, акушер-гинеколог, специально для Mirmam.pro
Полезное видео
Репродуктологи руководствуются количеством и качеством эмбрионов на 2-3 сутки. Если их 3-4 и более, то есть возможность подрастить до состояния бластоцисты и выбрать более качественных. При наличии 2-3 морул подсадку делают на 3 сутки. Даже при среднем качестве зародышей условия материнского организма более благоприятные, чем искусственные питательные среды.